Beschreibung des Produkts
Dieser ELISA-Kit wurde entwickelt, um Protein L in Lösungen, die Immunglobulin (Ig) oder Ig-Fragmente enthalten, nachzuweisen und zu quantifizieren. Es handelt sich um einen Sandwich-ELISA mit Mikrotiterstreifen, die mit einem affinitätsgereinigten Anti-Protein-L-IgY-Antikörper beschichtet sind.
Bei diesem Assay werden die Proben gekocht, um die Ig/Ig-Fragmente vom Protein L in der Lösung zu trennen, zentrifugiert und in den Streifenvertiefungen inkubiert.
Das gebundene Protein L wird dann durch Zugabe eines mit Meerrettichperoxidase (HRP) konjugierten Anti-Protein-L-IgY-Antikörpers nachgewiesen.
Substrat wird hinzugefügt, um eine Farbänderung zu induzieren, die proportional zur Menge des gebundenen Proteins L aus der Probe ist. Die Farbänderung wird spektrophotometrisch bei 450 nm unter Verwendung eines Plattenlesegeräts quantifiziert.
Die Menge an Protein L in der Probe wird anhand einer Standardkurve bestimmt, die anhand einer Referenzprobe erstellt wurde. Die Referenzprobe sollte die gleiche Konzentration an Ig oder Ig-Fragmenten und vorzugsweise die gleiche Pufferzusammensetzung wie die Elutionsproben aus dem Protein-L-Affinitätschromatographie-Medium aufweisen. Sie sollte jedoch unter Verwendung einer anderen Reinigungsstrategie, z. B. Ionenaustauschchromatographie, hergestellt werden. Sobald eine Referenzprobe erstellt wurde, kann sie aliquotiert und für mehrere verschiedene Protein-L-ELISA-Assays verwendet werden.
Anwendungen
Bestimmung der Leckagemengen von Protein L bei der Protein-L-Medium-Reinigung von intaktem Immunglobulin oder Immunglobulinfragmenten (Ig oder Ig-Fragmente). Einige Fab-Proben müssen möglicherweise optimiert werden. Derzeit gibt es kein Protokoll für sdab-Moleküle.
Gebrauchsanweisung
Das Produkt ist ein gebrauchsfertiges Set, eine Gebrauchsanweisung liegt bei. Sicherheitsvorkehrungen wie Laborkittel, Handschuhe und Schutzbrille sollten verwendet werden.
Versand und Lagerung
Das Produkt wird gekühlt (+4 °C) versandt, mit Ausnahme der Protein-L-Referenz, die gefroren bei -20 °C versandt wird.
Bei Ankunft die Komponenten gekühlt (+4 °C) lagern, mit Ausnahme der Protein-L-Referenz, die bei -20/-80 °C gelagert werden sollte:
- Streifen (96 Wells), unbenutzte Streifen in einem verschlossenen Beutel bei +4 °C lagern.
- HRP-konjugiertes Anti-Protein L pAb und EC-Blue Enhanced TMB-Substrat, lichtgeschützt lagern.
- Protein L-Referenz, in Arbeitsaliquoten lagern, um wiederholtes Einfrieren/Auftauen zu vermeiden.
Spezifikationen
Das Protein L Ligand Leakage ELISA-Kit ist in zwei Versionen erhältlich – als Standard-Kit (10-0027) und als XL-Kit (10-0028). Das XL-Kit enthält fünf Fläschchen mit Protein L-Referenz anstelle von einem und kann für Prozessanpassungszwecke verwendet werden.
Komponenten:
- 12 Streifen (96 Vertiefungen) Anti-Protein L beschichtet
- 100-fache Lösung HRP-konjugiertes Anti-Protein L pAb
- Protein L-Referenz
- EC-Blue Verbessertes TMB-Substrat
- Stop-Lösung
- PBS-Tween-Tabletten
