Produktbeskrivning
Phaseolus vulgaris-lektin (PHA-E) isoleras från röda kidneybönor och renas genom affinitetskromatografi och jonbyteskromatografi. Det är ett tetrameriskt protein med en molekylvikt på 128 kDa. Lektinet känner igen och binder specifikt till terminala galaktos-, N-acetylglukosamin- och mannosrester av komplexa glykaner på glykoproteiner från däggdjur (1).
På grund av dess starka erytrocytagglutinerande aktivitet kallas det också Erythroagglutinin (PHA-E). PHA-E är inte blodgruppsspecifikt (2). Mindre än 5 µg/ml agglutinerar mänskliga erytrocyter av typ O och agglutinationen kan hämmas av vissa oligosackarider.
Medicagos PHA-E-lektin levereras som ett vitt frystorkat pulver från en buffert som innehåller 50 mM NH4HCO3. Lektinets renhet bestäms genom SDS-PAGE, som genererar ett enda band vid 34 kDa. Den finns i flaskor som innehåller 5 mg frystorkat pulver och produkten får endast användas för laboratoriearbete.
Tillämpningar
- Studier av erytrocytagglutination
- Modellsystem för hur proteiner känner igen kolhydrater
Anvisningar för användning
Lektinet kan rekonstitueras med 2 ml avjoniserat vatten före användning. Snurra injektionsflaskan försiktigt tills den är helt upplöst. Aggregation tros uppstå i närvaro av höga koncentrationer av 2-merkaptoetanol. Lösningen kan rekonstitueras i denna buffert till önskad arbetskoncentration.
Frakt och lagring
Produkten levereras vid -20°C, men för transport under dagen kan den levereras vid rumstemperatur. Det frystorkade pulvret är stabilt i mer än tre år från tillverkningsdatum vid förvaring under -20°C. Efter rekonstituering med avjoniserat vatten kan lösningen förvaras fryst i fungerande alikvoter i upp till 12 månader.
Referenser
(1) Chrispeels M. J., Raikhel N. V. (1991). Lectins, Lectin Genes, och deras roll i växtförsvaret. The Plant Cell Vol.3, 1-9.
(2) Liener I. E., Sharon N., Goldstein I. J., (1986) The Lectins - Properties, Functions and Applications in Biology and Medicine.
