Produktbeskrivning
Inom molekylärbiologin används TBE- och TAE-buffertar för agaros- och polyakrylamidgelelektrofores. TBE-buffert är lämplig vid analys av DNA-fragment från PCR-amplifiering, DNA-isoleringsprotokoll eller DNA-kloningsexperiment. Den är anpassad för att separera mindre DNA-fragment (mindre än 1500 bp på en 0,8% agarosgel).
TAE är fördelaktigt för hög upplösning av långa nukleinsyrafragment
fragment (längre än 1500 bp) på agarosgeler. Den har en lägre buffertkapacitet än TBE och i allmänhet rör sig nukleinsyrafragment långsammare i TAE-geler (förutom linjärt dsDNA, som tenderar att röra sig snabbare). TBE har större buffringskapacitet och ger skarpare upplösning än TAE. TBE-geler ger dock i allmänhet en sämre återvinning av nukleinsyror jämfört med TAE-geler. TAE används också för analys av nativt (icke-denaturerande) RNA
analys och i denaturerande geler (i stället för MOPS-buffert) med föregående denaturering av RNA-proverna i varm formamid.
Medicagos TBE- och TAE-buffertar levereras som en förvägd pulverblandning i förslutna påsar som ger 1000 ml 1x, 5x eller 10x Tris-borat-EDTA-buffert eller 50x Tris-acetat-EDTA-buffert med pH 8,3 vid 25°C.
Tillämpningar
- Körbuffert för elektrofores av nukleinsyror för agaros- och polyakrylamidgeler
- Nativ och denaturerande RNA-analys
- Northern blotting
Anvisningar för användning
Töm en påse med TAE- eller TBE-buffert i en laboratoriekolv eller bägare placerad på en magnetomrörare. Tillsätt 300 ml avjoniserat vatten och rör om lösningen i några minuter. Justera volymen upp till 1000 ml, rör om till full upplösning och buffertlösningen är klar att använda.
Frakt och lagring
TBE- och TAE-buffertarna levereras i rumstemperatur. Förvara påsarna på en torr plats i rumstemperatur. Hållbarheten är tre år efter tillverkningsdatum.
Specifikationer
| TBE 1x | TBE 5x | TBE 10x | ||
| Kemikalier | Analytisk grad | Analytisk grad | Analytisk grad | |
| RNAse/DNase-aktivitet | Ej detekterbar | Ej detekterbar | Ej detekterbar | |
| Format | Exakt förvägd pulverblandning |
Exakt förvägd pulverblandning |
Exakt förvägd pulverblandning |
|
| Sammansättning | 0,089 M Tris-borat 0,002 M EDTA |
0,445 M Tris-borat 0,010 M EDTA |
0,89 M tris-borat 0,020 M EDTA |
|
| Volym | 1000 ml | 1000 ml | 500 ml | |
| pH-värde | 8,3 ± 0,15 vid 25°C (1x lösning) | 8,3 ± 0,15 vid 25°C (1x lösning) | 8,3 ± 0,15 vid 25°C (1x lösning) | |
