Produktbeskrivning
Triticum vulgaris lektin eller vetegroddsagglutinin (WGA) isoleras från Triticum vulgaris (vetegroddar) och renas genom affinitetskromatografi. Lektinet har två subenheter och en molekylvikt på 36 kDa. WGA binder selektivt till N-acetylglukosamin (GlcNAc) och till N-acetylneuraminsyra (sialinsyra) i glykoproteiner och glykolipider (1).
The WGA lectin agglutinates erythrocytes and most types of malignant cells. It agglutinates rabbit erythrocytes at < 0.1 µg/ml following trypsin treatment of the cells. Adding 300 mM N-Acetyle-D-Glucosamine gives an inhibition with a titer that is at least 8-fold lower than the control.
Agglutinin från vetegroddar hämmar C5a-receptorns interaktion, vilket har betydelse för studier av receptorns mikroheterogenitet och ligandbindningsställen (1).
WGA är tillsammans med Con A det lektin som används mest som analytiskt och preparativt medel vid studier av glykoproteiner och cellyteproteiner. Det immobiliserade lektinet kan användas för affinitetskromatografi av celler och subcellulära partiklar.
Medicagos WGA levereras som ett vitt till ljusgult frystorkat pulver från en buffert som innehåller 10 mM CH3COONH4. Inga konserveringsmedel tillsätts. Renheten hos WGA bestäms genom SDS-elektrofores som genererar tre band, motsvarande de tre isolektinerna hos WGA. Proteininnehållet verifieras med spektrofotometri. Lektinet finns i flaskor som innehåller 100 mg, 25 mg eller 10 mg pulver och produkten får endast användas för laboratoriearbete.
Tillämpningar
- Studier av glykoproteiner och glykolipider
- Rening av membranproteiner
- Affinitetskromatografi av celler och subcellulära partiklar
- Agglutinationsstudier
Anvisningar för användning
Lektinet kan rekonstitueras med 2 ml avjoniserat vatten före användning. Snurra injektionsflaskan försiktigt tills den är helt upplöst. Aggregation tros uppstå i närvaro av höga koncentrationer av 2-merkaptoetanol.
Frakt och lagring
Produkten levereras vid -20°C, men för transport under dagen kan den levereras vid rumstemperatur. Det frystorkade pulvret är stabilt i mer än tre år från tillverkningsdatum vid förvaring under -20°C. Efter rekonstituering med avjoniserat vatten kan lösningen förvaras fryst i fungerande alikvoter i upp till 12 månader.
Referenser
(1) Johnson R. J., Simpson S., Van Epps D. E., Chenoweth D. E. (1992) Vetegroddsagglutinin hämmar C5a-receptorns interaktion: konsekvenser för receptorns mikroheterogenitet och ligandbindningsstället. Journal of Leukocyte Biology Vol 52, Issue 1, 3-10.
