Beschreibung des Produkts
Artocarpus integrifolia-Lektin (Jacalin) wird aus Jackfruchtsamen isoliert und durch Affinitätschromatographie gereinigt. Das Lektin gehört zur Familie der Galaktose-bindenden Lektine (1) und hat eine tetramerische Zweikettenstruktur (Abbildung 1) mit einem Gewicht von 66 kDa (2).
Lektine sind aufgrund ihrer spezifischen Bindung an Kohlenhydratstrukturen auf der Zelloberfläche oder an anderen Stellen in der Hämatologie, Immunologie oder als spezifische Marker für Membranglykoproteinstrukturen nützlich (2). Jacalin wird vorzugsweise in Anwendungen zur Isolierung von IgA aus menschlichem Serum, zur Isolierung von menschlichen Plasmaglykoproteinen und für Anwendungen in der Histochemie verwendet. Das Lektin ist nach Neuraminidase-Behandlung blutgruppenspezifisch und agglutiniert menschliche Erythrozyten bei einer Konzentration von ≥ 7,8 µg/ml.
Eine posttranslationale proteolytische Modifikation von Jacalin verleiht dem Lektin eine neuartige Kohlenhydratbindungsstelle, an der der N-Terminus der a-Kette beteiligt ist. Die relative Affinität des Lektins zu Galaktosederivaten sowie die strukturelle Grundlage seiner T-Antigen-Spezifität lassen sich durch seine Proteinstruktur erklären (2).
Jacalin von Medicago wird als weißes lyophilisiertes Pulver aus einem Puffer mit 50 mMNH4HCO3, 10 µMCaCl2 und ohne Zusatz von Konservierungsstoffen geliefert. Die Reinheit des Lektins wird durch SDS-PAGE bestimmt, wobei zwei homogene Banden bei 15 kDa und 18 kDa entstehen. Die Lektinkonzentration wird durch Aminosäureanalyse bestimmt und beträgt mindestens 80 %. Das Material wird aus einer einzigen Charge hergestellt, ist homogen und stammt nicht aus tierischen Quellen. Es ist in Fläschchen mit 100 mg oder 10 mg lyophilisiertem Pulver erhältlich und darf nur für Laborarbeiten verwendet werden.
Anwendungen
- Isolierung von IgA aus menschlichem Serum
- Isolierung von menschlichen Plasmaglykoproteinen
- AIDS-Forschung
Gebrauchsanweisung
Das Lektin kann vor Gebrauch mit 2 ml entionisiertem Wasser rekonstituiert werden. Drehen Sie das Fläschchen vorsichtig, bis es vollständig aufgelöst ist. Es wird angenommen, dass bei hohen Konzentrationen von 2-Mercaptoethanol eine Aggregation auftritt.
Versand und Lagerung
Das Produkt wird bei -20 °C versandt, kann jedoch für den Transport innerhalb eines Tages bei Raumtemperatur versandt werden. Das lyophilisierte Pulver ist bei Lagerung unter -20 °C ab dem Herstellungsdatum mehr als fünf Jahre haltbar. Nach der Rekonstitution mit entionisiertem Wasser kann die Lösung in Arbeitsaliquoten bis zu 12 Monate lang tiefgefroren gelagert werden.
Referenzen
(1) Liener I. E., Sharon N., Goldstein I. J., (1986) Die Lektine – Eigenschaften, Funktionen und Anwendungen in Biologie und Medizin.
(2) Sankaranarayanan R., Sekar K., Banerjee R., Sharma V., Surolia A., Vijayan M, (1996) Eine neuartige Art der Kohlenhydraterkennung in Jacalin, einem Lektin der Familie der Moraceae mit einer b-Prisma-Faltung. Nature Structural Biology 3, 596–603.
(3) Strukturelle Grundlage für die ungewöhnliche Kohlenhydratbindungsspezifität von Jacalin gegenüber Galactose und Mannose. Bourne, Y., Astoul, C.H., Zamboni, V., Peumans, W.J., Menu-Bouaouiche, L., Van Damme, E.J., Barre, A., Rouge, P. (2002) Biochem.J. 364: 173–180.
