Produktbeskrivning
Artocarpus integrifolia-lektin (Jacalin) isoleras från jackfruktfrön och renas genom affinitetskromatografi. Lektinet tillhör familjen av galaktosbindande lektiner (1) och har en tetramerisk tvåkedjestruktur (figur 1) med en vikt på 66 kDa (2).
Lektiner är på grund av sin specifika bindning till kolhydratstrukturer på cellytan eller på andra ställen användbara inom hematologi, immunologi eller som specifika markörer för membranglykoproteinstrukturer (2). Jacalin används företrädesvis i applikationer för att isolera IgA från humant serum, isolera humana plasmaglykoproteiner och för applikationer inom histokemi. Lektinet är blodgruppsospecifikt efter neuraminidasbehandling och agglutinerar humana erytrocyter vid en koncentration på ≥ 7,8 µg/ml.
En posttranslationell proteolytisk modifiering av Jacalin ger lektinet ett nytt kolhydratbindningsställe som involverar N-terminalen av a-kedjan. Lektinets relativa affinitet för galaktosderivat, liksom den strukturella grunden för dess T-antigenspecificitet, förklaras av dess proteinstruktur (2).
Medicagos Jacalin levereras som ett vitt frystorkat pulver från en buffert som innehåller 50 mM NH4HCO3, 10 µM CaCl2, inga konserveringsmedel tillsätts. Renheten hos lektinet bestäms genom SDS-PAGE, vilket genererar två homogena band vid 15 kDa och 18 kDa. Lektinkoncentrationen bestäms genom aminosyraanalys, minst 80%. Materialet är tillverkat av en enda sats, det är homogent och härrör inte från något material av animaliskt ursprung. Det finns i flaskor som innehåller 100 mg eller 10 mg frystorkat pulver och får endast användas för laboratoriearbete.
Tillämpningar
- Isolering av IgA från humant serum
- Isolering av glykoproteiner i human plasma
- AIDS-forskning
Anvisningar för användning
Lektinet kan rekonstitueras med 2 ml avjoniserat vatten före användning. Snurra injektionsflaskan försiktigt tills den är helt upplöst. Aggregation tros uppstå i närvaro av höga koncentrationer av 2-merkaptoetanol.
Frakt och lagring
Produkten levereras vid -20°C, men för transport under dagen kan den levereras vid rumstemperatur. Det frystorkade pulvret är stabilt i mer än fem år från tillverkningsdatum vid förvaring under -20°C. Efter rekonstituering med avjoniserat vatten kan lösningen förvaras fryst i fungerande alikvoter i upp till 12 månader.
Referenser
(1) Liener I. E., Sharon N., Goldstein I. J., (1986) The Lectins - Properties, Functions and Applications in Biology and Medicine.
(2) Sankaranarayanan R., Sekar K., Banerjee R., Sharma V., Surolia A., Vijayan M, (1996) Ett nytt sätt att känna igen kolhydrater i jacalin, en Moraceae-växtlektin med en b-prismveck. Nature Structural Biology 3, 596-603.
(3) Strukturell grund för den ovanliga kolhydratbindande specificiteten hos jacalin mot galaktos och mannos. Bourne, Y., Astoul, C.H., Zamboni, V., Peumans, W.J., Menu-Bouaouiche, L., Van Damme, E.J., Barre, A., Rouge, P. (2002) Biochem.J. 364: 173-180.
