Beschreibung des Produkts
Galanthus nivalis Lektinoder Agglutinin (GNA) wird aus Schneeglöckchenzwiebeln isoliert. Es hat ein Molekulargewicht von 50 kDa und besteht aus vier identischen Untereinheiten (1). Das Lektin ist dafür bekannt, dass es Kaninchenerythrozyten agglutiniert, menschliche Erythrozyten jedoch nicht (1). Es bindet spezifisch an murines IgM-Immunglobulin und humanesα2-Makroglobulin. Strukturen, die (α-1,3)-Mannose-Reste enthalten, werden für die Bindung bevorzugt (2). Es enthält wenig oder gar keine Kohlenhydrate und benötigt keinCa2+oderMn2+für die Bindung, da es im Gegensatz zu den meisten mannose-spezifischen Lektinen kein Metalloprotein ist. Im Gegensatz zu den meisten mannose-bindenden Lektinen bindet GNA keine alpha-verknüpfte Glukose. GNA hat sich in der HIV-Forschung als nützlich erwiesen (3). Es eignet sich auch für Studien zur Blutkörperchenagglutination, aber auch als Modellsystem, um die molekularen Grundlagen der Erkennung von Kohlenhydraten durch Proteine zu verstehen.
Das GNA-Lektin von Medicago wird als weißes bis cremefarbenes lyophilisiertes Pulver geliefert. Die Reinheit des GNA-Lektins wird durch SDS-Elektrophorese bestimmt, die eine einzige Bande bei 13 kDa erzeugt, die den vier identischen Polypeptidketten entspricht. Das Lektin ist in Fläschchen mit 5 mg Pulver erhältlich und darf nur für Laborarbeiten verwendet werden.
Anwendungen
- Blutzellagglutinationsuntersuchungen
- Modellsysteme zum Verständnis der molekularen Grundlagen der Erkennung von Kohlenhydraten durch Proteine
- HIV-Forschung
Gebrauchsanweisung
Das Lektin kann vor Gebrauch mit 2 ml entionisiertem Wasser rekonstituiert werden. Drehen Sie die Durchstechflasche vorsichtig, bis sich das Lektin vollständig aufgelöst hat. Es wird angenommen, dass bei hohen Konzentrationen von 2-Mercaptoethanol eine Aggregation auftritt. Die Lösung kann in diesem Puffer auf die gewünschte Arbeitskonzentration rekonstituiert werden. In Abwesenheit von Laktose polymerisiert das Lektin, und bei einer Lagerung bei einem pH-Wert von 8,6–8,8 kommt es zu einer Ausfällung.
Versand und Lagerung
Das Produkt wird bei -20 °C versandt, kann jedoch für den Transport innerhalb eines Tages bei Raumtemperatur versandt werden. Das lyophilisierte Pulver ist bei Lagerung unter -20 °C ab dem Herstellungsdatum mehr als fünf Jahre haltbar. Nach der Rekonstitution mit entionisiertem Wasser kann die Lösung in Arbeitsaliquoten bis zu 12 Monate lang tiefgefroren gelagert werden.
Referenzen
(1) Naoto Shibuya, Irwin J. Goldstein, Els J. M. Van Damme und Willy J. Peumans. (1988) Bindungseigenschaften eines Mannose-spezifischen Lektins aus der Zwiebel der Schneeglöckchen (Galanthus nivalis)* J. Mol. Biol. Band 263, Nr. 2, Ausgabe vom 15. Januar, S. 728–734.
(2) Christine S. Wright, Hanae Kaku und Irwin J. Goldstein (1990). Kristallisation und vorläufige Ergebnisse der Röntgenbeugung von Schneeglöckchen-Lektin (Galanthus nivalis). J.Mol.Biol. Band 265, Nr. 3, Ausgabe vom 25. Januar, S. 1676–1677.
(3) Gilljam, G. AIDS-Forschung und humane Retroviren. Mai 1993; 9(5): 431–8.
(4) Das Mannose-spezifische Bulb-Lektin aus Galanthus nivalis (Schneeglöckchen) bindet Mono- und Dimannoside an unterschiedlichen Stellen. Strukturanalyse von raffinierten Komplexen mit einer Auflösung von 2,3 A und 3,0 A. Hester, G., Wright, C.S. (1996) J.Mol.Biol. 262: 516–31.
