Produktbeskrivning
Galanthus nivalis lektin eller agglutinin (GNA) isoleras från snödroppslökar. Det har en molekylvikt på 50 kDa och består av fyra identiska subenheter (1). Det är känt att lektinet agglutinerar erytrocyter från kanin men inte från människa (1). Det binder specifikt till murint IgM-immunoglobulin och humant α2-makroglobulin. Strukturer som innehåller (α-1,3)-mannosrester föredras för bindning (2). Det innehåller lite eller inget kolhydrat och behöver inte Ca2+ eller Mn2+ för bindning, eftersom det till skillnad från de flesta mannosspecifika lektiner inte är ett metalloprotein. Till skillnad från majoriteten av mannosbindande lektiner binder GNA inte alfa-länkad glukos. GNA har varit användbart i HIV-forskning (3). Det är också användbart för agglutineringsstudier av blodkroppar men också som ett modellsystem för att förstå den molekylära grunden för hur proteiner känner igen kolhydrater.
Medicagos GNA-lektin levereras som ett vitt till gräddfärgat frystorkat pulver. Renheten hos GNA-lektinet bestäms genom SDS-elektrofores, som genererar ett enda band vid 13 kDa som motsvarar de fyra identiska polypeptidkedjorna. Lektinet finns i flaskor som innehåller 5 mg pulver och får endast användas för laboratoriearbete.
Tillämpningar
- Agglutinationsstudier av blodkroppar
- Modellsystem för att hjälpa till att förstå den molekylära grunden för hur proteiner känner igen kolhydrater
- Forskning om hiv
Anvisningar för användning
Lektinet kan rekonstitueras med 2 ml avjoniserat vatten före användning. Snurra injektionsflaskan försiktigt tills den är helt upplöst. Aggregation tros uppstå i närvaro av höga koncentrationer av 2-merkaptoetanol. Lösningen kan rekonstitueras i denna buffert till önskad arbetskoncentration. I frånvaro av laktos kommer lektinet att polymeriseras och förvaring vid pH 8,6-8,8 orsakar utfällning.
Frakt och lagring
Produkten levereras vid -20°C, men för transport under dagen kan den levereras vid rumstemperatur. Det frystorkade pulvret är stabilt i mer än fem år från tillverkningsdatum vid förvaring under -20°C. Efter rekonstituering med avjoniserat vatten kan lösningen förvaras fryst i fungerande alikvoter i upp till 12 månader.
Referenser
(1) Naoto Shibuya, Irwin J. Goldstein, Els J. M. Van Damme och Willy J. Peumans. (1988) Bindningsegenskaper hos ett mannosspecifikt lektin från snödroppens (Galanthus nivalis) bulb* J. Mol. Biol. Vol. 263, nr 2, utgåvan den 15 januari, s. 728-734
(2) Christine S. Wright, Hanae Kaku och Irwin J. Goldstein (1990). Kristallisering och preliminära röntgendiffraktionsresultat av Snowdrop (Galanthus nivalis) Lectin. J.Mol.Biol. Vol. 265, nr 3, utgåva av den 25 januari, s. 1676-1677
(3) Gilljam, G. AIDS Reserach and Human Retroviruses. Maj 1993; 9(5): 431-8.
(4) Det mannosspecifika bulblektinet från Galanthus nivalis (snödroppe) binder mono- och dimannosider på skilda ställen. Strukturanalys av raffinerade komplex med 2,3 A och 3,0 A upplösning. Hester, G., Wright, C.S. (1996) J.Mol.Biol. 262: 516-31.
