Beschreibung des Produkts
Maackia amurensis-Lektin oder Leukoagglutinin (MAL) wird aus den Samen von Maackia amurensis (Amurbaum) isoliert und durch Affinitäts- und Ionenaustauschchromatographie gereinigt. Das Lektin besteht aus zwei homodimeren Untereinheiten, die durch Disulfidbrücken verbunden sind und jeweils ein Molekulargewicht von 75 kDa haben. MAL hat eine gut untersuchte mitogene Wirkung auf menschliche Leukozyten und eine marginale Fähigkeit zur Erythrozytenagglutination (1, 2).
MAL hat eine starke Affinität zu sialylierten Glykanen, hauptsächlich in Form von 3'-Sialyllactose, aber Lactose wird toleriert (3).
Die Hypersialylierung der Zelloberfläche ist charakteristisch für viele Krebszellen und gilt als wichtig für die Immunabwehrumgehung und Migration (4, 5). Dies bietet viele Möglichkeiten für die Krebsvorsorge und -forschung unter Verwendung von MAL.
Menschliche Influenzaviren binden sich mithilfe von sialylierten Glykanen an die Wirtszelle, wobei insbesondere die Bindung von 3'-Sialinsäure anstelle von 6'-Sialinsäure menschliche Influenzaviren von Vogelgrippeviren zu unterscheiden scheint (6).
Anwendungen
· Identifizierung von Krebszellen aufgrund von Hypersialylierung.
· Screening auf Bindungsstellen für humane Influenzaviren.
Gebrauchsanweisung
Das Lektin kann in einem für Ihre Anwendung geeigneten Puffer rekonstituiert werden.
Die Löslichkeit wird bei 1 g/l unter Verwendung von PBS, pH 7,4, festgestellt, aber höhere Konzentrationen und andere Puffer haben keine Probleme verursacht.
Versand und Lagerung
Das Produkt wird bei -20 °C versandt, kann jedoch für den Transport innerhalb eines Tages bei Raumtemperatur versandt werden. Das gefriergetrocknete Pulver ist bei Lagerung unter -20 °C ab Herstellungsdatum mehr als fünf Jahre haltbar.
Nach der Rekonstitution mit PBS, pH 7,4, kann die Lösung in Arbeitsaliquoten bis zu 12 Monate lang tiefgefroren gelagert werden.
Referenzen
(1) Imberty A, Gautier C, Lescar J, Pérez S, Wyns L, Loris R. (2000) Eine ungewöhnliche Kohlenhydratbindungsstelle, die durch die Strukturen von zwei Maackia amurensis-Lektinen in Komplex mit Sialinsäure-haltigen Oligosacchariden aufgedeckt wurde. Journal of Biological Chemistry, Band 275 (23), 17541-17548
(2) Kawaguchi T, Matsumoto I, Osawa T. (1974) Untersuchungen zu Hämagglutininen aus Samen der Maackia amurensis. Journal of Biological Chemistry, Band 249 (9), 2786-2792
(3) Geisler, C, & Jarvis, DL. (2011). Brief an das Glyco-Forum: Eine effektive Glykoanalyse mit Maackia amurensis-Lektinen erfordert ein klares Verständnis ihrer Bindungsspezifitäten. Glykobiologie, Band 21 (8), 988-993.
(4) Pearce, OM, & Läubli, H. (2016). Sialinsäuren in der Krebsbiologie und Immunität. Glykobiologie, Band 26 (2), 111-128.
(5) Tang, W., Mafune, K., Nakata, M., Konishi, T., Kojima, N., Mizuochi, T. und Makuuchi, M. (2003). Zusammenhang zwischen der histochemischen Expression von Maackia amurensis-Leukoagglutinin-positiven Glykokonjugaten und dem Verhalten von Magenkrebs beim Menschen. Histopathology, Band 42 (3), 239-245.
(6) Yamada S, Suzuki Y, Suzuki T, Le MQ, Nidom CA, Sakai-Tagawa Y, Muramoto Y, Ito M, Kiso M, Horimoto T, Shinya K, Sawada T, Kiso M, Usui T, Murata T, Lin Y, Hay A, Haire LF, Stevens DJ, Russell RJ, Gamblin SJ, Skehel JJ, Kawaoka Y. (2006). Hämagglutinin-Mutationen, die für die Bindung von H5N1-Influenza-A-Viren an Rezeptoren vom menschlichen Typ verantwortlich sind. Nature, Band 444 (7117), 378–382. Bild aus der RCSB PDB (RCSB.org) mit der PDB-ID 1BNA (H.R. Drew, R.M. Wing, T. Takano, C. Broka, S. Tanaka, K. Itakura, R.E.Dickerson, Struktur eines B-DNA-Dodekamers: Konformation und Dynamik (1981) Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78: 2179-2183).