Produktbeskrivning
Maackia amurensis lektin eller leucoagglutinin (MAL) isoleras från frön av Maackia amurensis (amurträd) och renas genom affinitetskromatografi och jonbyteskromatografi. Lektinet består av två homodimära subenheter som är förbundna med disulfidbroar, var och en med en molekylvikt på 75 kDa. MAL har en välstuderad mitogen förmåga på humana leukocyter och en marginell kapacitet för erytrocytagglutination (1, 2).
MAL har stark affinitet för sialylerade glykaner, främst i form av 3'-sialyllaktos, men laktos tolereras (3).
Hypersialylering av cellytan är karakteristiskt för många cancerceller och anses vara viktigt för immunundvikande och migration (4, 5). Detta ger många möjligheter för cancerscreening och studier med hjälp av MAL.
Humana influensavirus binder till värdcellen med hjälp av sialylerade glykaner, och specifikt är det bindningen av 3'-sialinsyra istället för 6'-sialinsyra som verkar skilja humana influensavirus från aviära virus (6).
Tillämpningar
· Identifiering av cancerceller på grund av hypersialylering.
· Screening för bindningsställen för humant influensavirus.
Anvisningar för användning
Lektinet kan rekonstitueras i en buffert som är lämplig för din applikation.
Lösligheten fastställs till 1 g/l med PBS, pH 7,4, men högre koncentrationer och andra buffertar har inte orsakat några problem.
Frakt och lagring
Produkten levereras vid -20 °C, men för transport under dagen kan den levereras vid omgivningstemperatur. Det frystorkade pulvret är stabilt i mer än fem år från tillverkningsdatumet när det förvaras under -20 °C.
Efter rekonstituering med PBS, pH 7,4, kan lösningen förvaras fryst i arbetsaliquoter i upp till 12 månader.
Referenser
(1) Imberty A, Gautier C, Lescar J, Pérez S, Wyns L, Loris R. (2000) En ovanlig kolhydratbindningsplats avslöjad av strukturerna hos två Maackia amurensis-lektiner komplexbundna med sialinsyrahaltiga oligosackarider. Journal of Biological Chemistry, volym 275 (23), 17541-17548
(2) Kawaguchi T, Matsumoto I, Osawa T. (1974) Studier av hemagglutinin från frön av Maackia amurensis. Journal of Biological Chemistry, volym 249 (9), 2786-2792.
(3) Geisler, C, & Jarvis, DL. (2011). Brev till Glyco-Forum: Effektiv glykoanalys med Maackia amurensis-lektiner kräver en tydlig förståelse av deras bindningsspecificiteter. Glykobiologi, volym 21 (8), 988-993.
(4) Pearce, OM, & Läubli, H. (2016). Sialinsyror i cancerbiologi och immunitet. Glykobiologi, volym 26 (2), 111-128.
(5) Tang, W., Mafune, K., Nakata, M., Konishi, T., Kojima, N., Mizuochi, T., & Makuuchi, M. (2003). Samband mellan histokemisk expression av Maackia amurensis leukoagglutinin-positiva glykokonjugat och beteendet hos magcancer hos människor. Histopatologi, volym 42 (3), 239-245.
(6) Yamada S, Suzuki Y, Suzuki T, Le MQ, Nidom CA, Sakai-Tagawa Y, Muramoto Y, Ito M, Kiso M, Horimoto T, Shinya K, Sawada T, Kiso M, Usui T, Murata T, Lin Y, Hay A, Haire LF, Stevens DJ, Russell RJ, Gamblin SJ, Skehel JJ, Kawaoka Y. (2006). Hemagglutininmutationer som ansvarar för bindningen av H5N1-influensa A-virus till receptorer av mänsklig typ. Nature, volym 444 (7117), 378–382. Bild från RCSB PDB (RCSB.org) av PDB ID 1BNA (H.R. Drew, R.M. Wing, T. Takano, C. Broka, S. Tanaka, K. Itakura, R.E.Dickerson, Struktur av en B-DNA-dodekamer: konformation och dynamik (1981) Proc.Natl.Acad.Sci.USA 78: 2179-2183).