Beschreibung des Produkts
Phaseolus vulgaris LektinL (PHA-L) wird aus roten Kidneybohnen isoliert und durch Affinitätschromatographie gereinigt. Es handelt sich um ein tetrameres Protein mit einem Molekulargewicht von 126 kDa, wobei jede Untereinheit etwa 31 kDa wiegt. Das Lektin erkennt und bindet spezifisch an terminale Galaktose-, N-Acetylglucosamin- und Mannose-Reste komplexer Glykane auf Glykoproteinen von Säugetieren (1).
PHA-L ist auch als Leukozyt-Agglutinin bekannt und weist eine hohe mitogene und leukozytäre Agglutinationsaktivität, jedoch eine geringe Erythrozyten-Agglutinationsaktivität auf (1). Das Lektin erkennt terminale Galaktosereste komplexer Glykane auf Glykoproteinen von Säugetieren wie Thyroglobulin (3). PHA-L agglutiniert menschliche Erythrozyten bei Konzentrationen von 250 µg/ml oder weniger nicht und ist nicht spezifisch für Blutgruppen.
Das PHA-L-Lektin von Medicago wird als weißes lyophilisiertes Pulver aus einem Puffer mit 10 mMNH4HCO3 geliefert.DieReinheit des Lektins wird durch SDS-PAGE bestimmt, wobei eine einzige Bande bei 31 kDa entsteht. Es ist in Fläschchen mit 10 mg oder 2 mg lyophilisiertem Pulver erhältlich und das Produkt ist nur für Laborarbeiten bestimmt.
Anwendungen
- Leukozytenagglutinationstests
- Untersuchungen zu Glykoproteinen von Säugetieren
- Modellsystem zur Erkennung von Kohlenhydraten durch Proteine
Gebrauchsanweisung
Das Lektin kann vor Gebrauch mit 2 ml entionisiertem Wasser rekonstituiert werden. Drehen Sie das Fläschchen vorsichtig, bis es vollständig aufgelöst ist. Es wird angenommen, dass bei hohen Konzentrationen von 2-Mercaptoethanol eine Aggregation auftritt. Die Lösung kann in diesem Puffer auf die gewünschte Arbeitskonzentration rekonstituiert werden.
Versand und Lagerung
Das Produkt wird bei -20°C versandt, kann jedoch für den Transport im Laufe des Tages auch bei Raumtemperatur versandt werden. Das gefriergetrocknete Pulver ist ab dem Herstellungsdatum mehr als drei Jahre haltbar, wenn es unter -20°C gelagert wird. Nach der Rekonstitution mit deionisiertem Wasser kann die Lösung in Arbeitsaliquots bis zu 12 Monate eingefroren gelagert werden.
Referenzen
(1) Liener I. E., Sharon N., Goldstein I. J., (1986) Die Lektine – Eigenschaften, Funktionen und Anwendungen in Biologie und Medizin.
(2) Schwache Protein-Protein-Wechselwirkungen in Lektinen: Die Kristallstruktur eines vegetativen Lektins aus der Hülsenfrucht Dolichos biflorus. Buts, L., Dao-Thi, M.H., Loris, R., Wyns, L., Etzler, M., Hamelryck, T. (2001) J.Mol.Biol. 309: 193–201.
(3) Chrispeels M. J., Raikhel N. V. (1991). Lektine, Lektin-Gene und ihre Rolle in der Pflanzenabwehr. The Plant Cell Vol. 3, 1–9.
