Produktbeskrivning
Phaseolus vulgaris lektin L (PHA-L) isoleras från röda kidneybönor och renas genom affinitetskromatografi. Det är ett tetrameriskt protein med en molekylvikt på 126 kDa, varje subenhet på cirka 31 kDa. Lektinet känner igen och binder specifikt till terminala galaktos-, N-acetylglukosamin- och mannosrester av komplexa glykaner på glykoproteiner från däggdjur (1).
PHA-L är också känt som leucoagglutinin och har hög mitogen och leucoagglutinerande aktivitet, men låg erytroagglutinerande aktivitet (1). Lektinet känner igen terminala galaktosrester i komplexa glykaner på glykoproteiner från däggdjur, t.ex. tyroglobulin (3). PHA-L agglutinerar inte mänskliga erytrocyter vid koncentrationer på 250 µg/ml eller mindre och är ospecifikt för blodgrupper.
Medicagos PHA-L-lektin levereras som ett vitt frystorkat pulver från en buffert som innehåller 10 mM NH4HCO3. Lektinets renhet bestäms genom SDS-PAGE som genererar ett enda band vid 31 kDa. Det finns i flaskor som innehåller 10 mg eller 2 mg frystorkat pulver och produkten får endast användas för laboratoriearbete.
Tillämpningar
- Studier av leukocytagglutination
- Studier av glykoproteiner från däggdjur
- Modellsystem för hur proteiner känner igen kolhydrater
Anvisningar för användning
Lektinet kan rekonstitueras med 2 ml avjoniserat vatten före användning. Snurra injektionsflaskan försiktigt tills den är helt upplöst. Aggregation tros uppstå i närvaro av höga koncentrationer av 2-merkaptoetanol. Lösningen kan rekonstitueras i denna buffert till önskad arbetskoncentration.
Frakt och lagring
Produkten levereras vid -20°C, men för transport under dagen kan den levereras vid rumstemperatur. Det frystorkade pulvret är stabilt i mer än tre år från tillverkningsdatum vid förvaring under -20°C. Efter rekonstituering med avjoniserat vatten kan lösningen förvaras fryst i fungerande alikvoter i upp till 12 månader.
Referenser
(1) Liener I. E., Sharon N., Goldstein I. J., (1986) The Lectins - Properties, Functions and Applications in Biology and Medicine.
(2) Svaga protein-protein-interaktioner i lektiner: kristallstrukturen hos en vegetativ lektin från baljväxten Dolichos biflorus. Buts, L., Dao-Thi, M.H., Loris, R., Wyns, L., Etzler, M., Hamelryck, T. (2001) J.Mol.Biol. 309: 193-201.
(3) Chrispeels M. J., Raikhel N. V. (1991). Lectins, Lectin Genes och deras roll i växtförsvaret. The Plant Cell Vol.3, 1-9.
